Morphoquantitative study of Rattus norvegicus submucosal plexus by different neuronal evidentiation histochemical techniques / Estudio morfocuantitativo del plexo submucoso de Rattus norvegicus por medio de diferentes técnicas histoquímicas para verificar características neuronales

Enteric nervous plexuses have been the object of several studies, specially the myenteric plexus whose studies describe its organization, functions and alterations. On the other hand, the submucosal plexus has been less studied and still needs descriptive studies. To analyze morphologically and quantitatively submucosal neurons of the jejunum of 90-day-old healthy rats using different techniques for neuronal staining as a way to provide normality data to compare with future experimental studies. Whole mount preparations of the jejunum were submitted to Giemsa, NADH-diaphorase and NADPH-diaphorase techniques to stain the total neuronal population, more metabolically active subpopulation and subpopulation of nitrergic neurons, respectively. Neurons of the submucosal plexus of adult rats are mainly organized in ganglia with varied sized and shapes. Giemsa technique stained 243.93 ± 7.68 neurons per mm2. Regarding the total population stained by Giemsa, NADH- diaphorase positive (139.09 ± 11.14/mm2) neurons represented 57 % and NADPH-diaphorase positive (18.17 ± 0.28/mm2) represented 7.5 %. The area of the cell body was bigger in nitrergic neurons (412.29 ± 150.22) than in the ones stained by Giemsa (254.71 ± 63.32) and NADH-diaphorase positive (243.98 ± 123.82).

El plexo nervioso entérico ha sido objeto de varios estudios, especialmente el plexo mientérico, cuyos estudios consisten en describir su organización, funciones y alteraciones. Por otro lado, el plexo submucoso ha sido menos investigado y todavía necesita estudios descriptivos. Para analizar morfológica y cuantitativamente las neuronas de la submucosa del yeyuno de ratas de 90 días de edad, se realizaron diferentes técnicas de tinción neuronales, en animales sanos, como una forma de proporcionar datos de normalidad y compararlo con futuros estudios experimentales. Se realizaron montajes con preparados enteros del yeyuno que fueron sometidos a las técnicas de Giemsa, de NADPH-diaforasa y NADH-diaforasa para teñir la población total neuronal, subpoblación más activa metabólicamente y subpoblación de neuronas nitrérgicas, respectivamente. Las neuronas del plexo submucoso de ratas adultas se organizan principalmente en los ganglios con variaciones de tamaño y formas. Con la técnica de Giemsa se tiñeron 243.93±7.68 neuronas por mm2. Con respecto a la población total teñida con Giemsa, fueron positivas para NADH- diaforasa en 139.09 ±11.14 / mm2 neuronas, representando el 57% y fueron positivas para NADPH-diaforasa en 18,17 ± 0,28 / mm2 neuronas, lo que representó el 7,5%. El área del cuerpo celular fue mayor en neuronas nitrérgicas (412,29 ± 150.22) que en las teñidas con Giemsa (254,71 ± 63,32) y NADH-diaforasa positivas (243,98 ± 123,82).

Morphoquantitative study of the submucous plexus (of Meissner) of the jejunum-ileum of young and old guinea pigs / Estudo morfoquantitativo do plexo submucoso (de Meissner) do jejuno-íleo de cobaias jovens e velhas

OBJECTIVE: To study the aging of submucous plexus of the small intestine (jejunum-ileum) of the guinea pigs from the quantitative, structural and ultrastructural perspective. METHOD: Chemical preparations of membrane of the jejunum-ileum of old and young animals with the use of light and electronic microscope. RESULTS: The ganglia of young animals presented between 1 and 56 neurons and the old animals presented from 1 to 30 neurons. The mean density of the ganglia by cm² in the young jejunum-ileum was of 551±36.89 and in the old one 413±11.86. The density of the neurons was 5011±291.11 neurons/cm² average in young animals and 2918±120.70 neurons/cm² in the old ones. The size of the neurons varied in both age groups. The collagen fibers in the ganglia of old animals they were condensed. Degenerated mitochondrias in the interior of the cell were frequent in the old animals. CONCLUSION: In submucous plexus of the jejunum-ileum there is a loss of 38 percent of the neurons with aging.

OBJETIVO: Estudar o envelhecimento do plexo submucoso do intestino delgado (jejuno-íleo) das cobaias do ponto de vista quantitativo, estrutural e ultra-estrutural. MÉTODO: Preparados de membrana do jejuno-íleo de animais jovens e velhos com a utilização de microscopia de luz e eletrônica. RESULTADOS: Os gânglios de animais jovens apresentaram entre 1 e 56 neurônios e os animais velhos apresentaram de 1 a 30 neurônios. A densidade média dos gânglios por cm² no jejuno-íleo jovem foi de 551±36,89 e no velho foi de 413±11,86. A densidade dos neurônios foi de 5011±291,11 neurônios/cm² em média nos animais jovens e 2918±120,70 neurônios/cm² nos velhos. O tamanho dos neurônios variou em ambos os grupos etários. As fibras colágenas nos gânglios de animais velhos estavam mais condensadas. Mitocôndrias degeneradas no interior da célula foram freqüentes nos animais velhos. CONCLUSÃO: No plexo submucoso do jejuno-íleo há uma perda de 38 por cento dos neurônios com o envelhecimento.

Estudo morfológico e morfométrico dos gânglios submucosos e das camadas musculares e avaliaçäo da atividade da acetilcolinesterase do cólon do rato com hipertrofia secundária a estenose cirúrgica experimental / Morphological and quantitative study of submucosal ganglia and muscle layers and determination of acetylcholinesterase activity of hypertrophic colon of the rat above experimental stenosis

Fez-se estudo morfométrico das camadas musculares e dos gânglios do plexo submucoso do intestino do rato com hipertrofia experimental do cólon. A atividade da acetilcolinesterase (AChE) também foi determinada como primeiro passo para avaliaçäo de possíveis alteraçöes do sistema colinérgico. Quarenta e dois ratos Wistar, machos, foram divididos em dois grupos: Grupo Operado (GO) no qual os animais foram submetidos a estenose cirúrgica parcial do cólon e, Grupo Controle (GC) no qual os animais näo foram operados. Todos os animais do GO foram sacrificados 28 dias após a cirurgia e três espécimes de tecido foram obtidos do cólon hipertrófico. Fragmentos da regiäo correspondente do cólon foram obtidos nos animais do GC. O primeiro espécime foi processado para avaliaçäo da atividade da AChE através de método colorimétrico, usando um espectrofotômetro. O segundo espécime foi usado para avaliar parâmetros morfométricos dos gânglios e neurônios submucosos. A camada submucosa foi removida por delaminaçäo, distendida sobre lâmina de vidro e corada pelo cresil violeta 0,5 por cento. O terceiro espécime foi fixado em Bouin, incluído em parafina e feitos cortes histológicos, que foram corados pela hematoxilina e eosina e Heidenheim, utilizados para estudo das camadas musculares. O estudo morfométrico dos gânglios, dos pericários, núcleos e nucléolos dos neurônios e das camadas musculares foi realizado com auxílio de analisador de imagem acoplado a computador. Os animais operados mostraram hipertrofia significativa do cólon a montante da área da estenose (p<0,00001). As dimensöes dos gânglios, pericários, núcleos e nucléolos dos neurônios foram significativamente maiores nos animais do GO (p<0,00001). Estes resultados indicam que a hipertrofia muscular foi acompanhada por aumento das dimensöes neuronais e sugerem um possível aumento da atividade metabólica e da síntese protéica dos neurônios submucosos. Entretanto, o número de neurônios/gânglio foi menor nos animais do GO em relaçäo ao GC. A atividade da AChE também foi menor nos fragmentos do cólon hipertrófico (p<0,00001). A origem da reduçäo da atividade da AChE näo ficou esclarecida. É possível que, entre outros fatores, o crescimento muscular näo foi acompanhado na mesma proporçäo pelo aumento do tecido nervoso e da AChE, levando a diluiçäo da atividade enzimática...